血磷濃度檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1655
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入1 mL蒸餾水溶解，再緩慢加272 μL濃硫酸，用不完的試劑2-8℃保存一周；

2. 試劑三：臨用前取1瓶加入5.5 mL蒸餾水充分溶解，再加入0.8 mL試劑二，充分混合，用不完的試劑2-8℃保存3天；

3. 標準液：10 mmol/L磷標準液。

產(chǎn)品說明：
血磷主要指血中的無機磷，以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關系密切，在以mg/dL表示時，二者的乘積(［Ca］×［P］)為30～40。當(［Ca］×［P］)>40，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織；若(［Ca］×［P］)<35則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到維生素D3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。
去除血清中有機磷后，無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被硫*亞鐵還原后呈藍色，在660nm有光吸收；通過測定660nm吸光度，計算血液中磷含量。

技術指標：
低檢出限：0.0115 mmol/L
線性范圍：0.015625-5 mmol/L
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

血清預處理：吸取50μL血清，加950μL試劑一，混勻后8000rpm，室溫離心10min，取上清液，待測。
二、測定步驟

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至660nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2. 標準溶液的稀釋：取100μL 10 mmol/L無機磷，加入900μL蒸餾水，充分混勻，配制成1 mmol/L標準液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實驗中每管需要50μL，為減小實驗誤差，故配制大體積。）

3. 樣本測定：在1.5mLEP管或96孔板中依次加入以下試劑

實驗實例：

1. 取鴨血清按照測定步驟操作，使用96孔板測得A測定管=0.806，A空白管=0.056，A標準管=0.539，計算得：血磷含量（mmol/L）=20×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)=31.06 mmol/L。

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