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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法離子系列BC2860-50T/48S血清總鐵結(jié)合能力(TIBC)檢測(cè)試劑盒 離子

血清總鐵結(jié)合能力(TIBC)檢測(cè)試劑盒 離子
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
血清總鐵結(jié)合能力(TIBC)檢測(cè)試劑盒 離子
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Serum Total Iron Binding Capacity(TIBC) Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC2860-50T/48S

更新時(shí)間:2024-07-09

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1836

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹


血清總鐵結(jié)合能力(TIBC)檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見(jiàn)分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào):BC2860
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體50 mL×1瓶2-8保存
試劑二液體5 mL×1瓶2-8保存
試劑三液體1 mL×1支2-8保存
試劑四A液體2.5 mL×1瓶2-8保存
試劑四B液體2.5 mL×1瓶2-8保存
試劑五液體15 mL×1瓶2-8保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8保存

溶液的配制:

  1. 試劑四:臨用前根據(jù)用量將A液和B液按1:1混合,當(dāng)天用完;

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前加0.9mL蒸餾水溶解,得到40μmol/mLFeSO4溶液,2-8保存8。

產(chǎn)品說(shuō)明:
血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。
Fe2+與菲洛嗪反應(yīng)形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe3+結(jié)合,可以被還原成Fe2+,此時(shí)吸光度A1與未結(jié)合Fe3+數(shù)量正相關(guān);酸化后,轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe3+釋放,并且進(jìn)一步被還原成Fe2+,此時(shí)吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關(guān)。A2減A1TIBC呈正比。


技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:第一次測(cè)量的檢出限為0.0002 μmol/mL;第二次測(cè)量的檢出限為0.0017 μmol/mL。
線性范圍:第一次測(cè)量的線性范圍為0.00195-0.5 μmol/mL;第二次測(cè)量的線性范圍為0.00195-0.5 μmol/mL。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、EP管、蒸餾水。
操作步驟:

  • 測(cè)定步驟(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))



1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取10μL 40μmol/mLFeSO4標(biāo)準(zhǔn)液,加入1590μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.25μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實(shí)驗(yàn)中每管需要100μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,故配制大體積。)
2、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至562nm,蒸餾水調(diào)零。
3、試劑一37℃預(yù)熱10min。
4、樣本測(cè)定(在EP管中加入下列試劑)

試劑名稱(μL測(cè)定管空白管標(biāo)準(zhǔn)管
血清100--
標(biāo)準(zhǔn)液--100
蒸餾水-100-
試劑一700700700
試劑二100--
試劑三-100100
混勻,37℃反應(yīng)10min
試劑四100100100
混勻,37℃反應(yīng)5min,測(cè)定562nm處吸光值,分別記為A1測(cè)、A1空、A1標(biāo),并計(jì)算ΔA1測(cè)=A1測(cè)-A1空、ΔA1標(biāo)= A1標(biāo)-A1空。測(cè)完后將反應(yīng)液倒回對(duì)應(yīng)EP管后加入試劑五。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測(cè)1-2次。
試劑五300300300
混勻,37℃反應(yīng)5min,測(cè)定562nm處吸光值,分別記為A2測(cè)、A2空、A2標(biāo)并計(jì)算ΔA2測(cè)=A2測(cè)-A2空、ΔA2標(biāo)= A2標(biāo)-A2空。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測(cè)1-2次。

二、血清總鐵結(jié)合力計(jì)算
總鐵結(jié)合能力定義:37℃條件下,每升血清結(jié)合Fe3+μmol數(shù)。
總鐵結(jié)合能力TIBC(μmol/L=C標(biāo)準(zhǔn)×ΔA2測(cè)÷ΔA2標(biāo)-C標(biāo)準(zhǔn)×ΔA1測(cè)÷ΔA1標(biāo)
=250×ΔA2測(cè)÷ΔA2標(biāo)-ΔA1測(cè)÷ΔA1標(biāo))
C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)液濃度,0.25μmol/mL=250μmol/L。
注意事項(xiàng):
1. A1測(cè)小于0.1時(shí),建議將樣本用蒸餾水適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2. 試劑二、試劑四有一定的毒性,操作時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)措施。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取100μL用蒸餾水稀釋4倍的駱駝血清,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA1測(cè)=A1測(cè)-A1=0.356,ΔA1標(biāo)=A1標(biāo)-A1=0.669,ΔA2測(cè)=A2測(cè)-A2=0.819ΔA2標(biāo)=A2標(biāo)-A2=0.519,計(jì)算總鐵結(jié)合能力得:總鐵結(jié)合能力TIBC(μmol/L=250×ΔA2測(cè)÷ΔA2標(biāo)-ΔA1測(cè)÷ΔA1標(biāo))×4=1045.897 μmol/L。

  2. 取100μL用蒸餾水稀釋8倍的鵝血清,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA1測(cè)=A1測(cè)-A1=0.588ΔA1標(biāo)=A1標(biāo)-A1=0.669,ΔA2測(cè)=A2測(cè)-A2=0.797ΔA2標(biāo)=A2標(biāo)-A2=0.519,計(jì)算總鐵結(jié)合能力得:總鐵結(jié)合能力TIBC(μmol/L=250×ΔA2測(cè)÷ΔA2標(biāo)-ΔA1測(cè)÷ΔA1標(biāo))×8=1313.443 μmol/L

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