儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
堿性木聚糖酶活性檢測試劑盒糖代謝
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Alkaline Xylanase（BAX）Activity Assay Kit
別名
堿性木聚糖酶試劑盒堿性木聚糖酶測試盒
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

產(chǎn)品型號(hào)：BC3615-100T/48S

更新時(shí)間：2024-07-09

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1214

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

堿性木聚糖酶（BAX）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC3615
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
緩沖液	液體70 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體8 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體12 mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

標(biāo)準(zhǔn)品：10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配制成100μmol/mL的木糖標(biāo)準(zhǔn)液，2-8℃保存8周。

產(chǎn)品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，堿性木聚糖酶（BAX）一般分離自最適生長pH為9-11的微生物。
BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計(jì)算BAX活力。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1、發(fā)酵液：發(fā)酵液于8000rpm，4℃，離心15min，取上清，置冰上作為待測樣本。
2、組織樣本：稱0.1g組織，加入1mL緩沖液，冰上充分研磨。4℃，8000rpm離心15min，取上清置冰上待測。
3、酶干粉：稱1mg，加1mL緩沖液溶解后置冰上待測。
注：含還原糖較高的樣本（如植物果實(shí)等）可用蒸餾水進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。
二、測定步驟

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：臨用前按下表將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為6、5、4、3、2、1μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。

序號(hào)	稀釋前濃度（μmol/mL）	標(biāo)準(zhǔn)品體積（μL）	蒸餾水體積（μL）	稀釋后濃度（μmol/mL）
1	100	100	900	10
2	10	120	80	6
3	10	100	100	5
4	10	80	120	4
5	10	60	140	3
6	10	40	160	2
7	10	40	360	1

備注：實(shí)驗(yàn)中每管需要60μL。

樣本測定（在EP管中加入下列試劑）

試劑名稱（μL）	對照管	測定管	空白管	標(biāo)準(zhǔn)管
樣本	60	60	-	-
標(biāo)準(zhǔn)品	-	-	-	60
蒸餾水	-	-	60	-
緩沖液	90	90	90	90
試劑一	-	60	60	60
渦旋混勻，置于50℃水浴鍋中反應(yīng)30min，立即沸水浴中10min滅活。(注意不要讓蓋子爆開，以免進(jìn)水，改變了反應(yīng)體系)
試劑一	60	-	-	-
試劑二	90	90	90	90
渦旋混勻，沸水浴中準(zhǔn)確顯色5min(注意不要讓蓋子爆開，以免進(jìn)水改變了反應(yīng)體系)，冷卻至室溫后，吸取200μL于96孔板或微量玻璃比色皿中，盡快測定各管540nm下的吸光度，分別記為A對照、A測定、A空白、A標(biāo)準(zhǔn)。計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白?？瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)曲線只需測1-2次。每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對照管。

注意事項(xiàng)：
吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~1.2之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計(jì)算公式中的稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1179g橙子加入1mL緩沖液進(jìn)行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋10倍后按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=1.194-1.040=0.154，帶入標(biāo)曲y=0.2017x-0.1171（R²=0.999），計(jì)算x=1.344，按樣本質(zhì)量計(jì)算BAX活性得：BAX活力（U/g 質(zhì)量）= x÷W2÷30×F =1.344÷0.1179÷30×10=3.80 U/g 質(zhì)量。
取泡菜汁離心取上清按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.925-0.169=0.756，帶入標(biāo)曲y=0.2017x-0.1171（R²=0.999），計(jì)算x=4.329，按發(fā)酵液計(jì)算BAX活力得：BAX活力（U/mL）= x÷T×F =4.329÷30×1=0.144U/mL。