儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
游離*固醇（FC）含量測(cè)試盒脂肪酸代謝
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Free Cholestenone(FC) Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說(shuō)明書

產(chǎn)品型號(hào)：BC1890-50T/48S

更新時(shí)間：2024-07-09

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：1538

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

游離*固醇（FC）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC1890
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

提取液：自備異丙醇，大約需要60mL，常溫保存；試劑盒內(nèi)提供一個(gè)30mL棕色空瓶，僅做分裝使用，請(qǐng)自行標(biāo)注試劑名稱。
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg*固醇，臨用前加入517 μL提取液，振蕩溶解，即為50 μmol/mL的*固醇標(biāo)準(zhǔn)品，2-8℃可保存4周。
工作液的配制：根據(jù)樣本量將試劑一：試劑二按9mL：60μL（約10T）的比例配制工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說(shuō)明：
FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。測(cè)定原理：FC氧化酶催化FC生成4-膽甾烯酮和H₂O₂，過(guò)氧化物酶催化H₂O₂、4-氨基安*比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰，其顏色深淺與FC含量成正比。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、天平、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、可調(diào)式移液槍、EP管、冰、蒸餾水、異丙醇（AR，98%）。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者用提取液稀釋樣本（血清（漿）用蒸餾水稀釋）后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
提取液中含有使蛋白變性的成分，故按蛋白濃度計(jì)算時(shí)需要重新提取蛋白進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1054g大鼠腎臟加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿，按照測(cè)定步驟操作，使用1mL玻璃比色皿測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白=0.592-0.053=0.539，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7703x-0.0021，R²=0.9989，計(jì)算x=0.702，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

FC含量（μmol/g 質(zhì)量）=x÷W ×F =6.66 μmol/g 質(zhì)量。

取5×10⁶個(gè)BNL細(xì)胞加入1mL提取液進(jìn)行超聲破碎，按照測(cè)定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白=0.138-0.053=0.085，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7703x-0.0021，R²=0.9989，計(jì)算x=0.113，按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算含量得：

FC含量（μmol/10⁶ cell）= x÷N×F =0.0226 μmol/10⁶cell。

取人血清樣本，直接按照測(cè)定步驟操作，使用1mL玻璃比色皿測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白=0.337-0.041=0.296，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7703x-0.0021，計(jì)算x=0.387，R²=0.9989，按血清（漿）等液體體積計(jì)算含量得：

FC含量（μmol/dL）=x×100×F =38.7 μmol/dL。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,et al. Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus). International Journal of Biological Macromolecules. April 2019;127:178-186.
Huan Guo,Shang Lin,MinLua Jia,et al. Characterization, in vitro binding properties, and inhibitory activity on pancreatic lipase of β-glucans from different Qingke (Tibetan hulless barley) cul tivars. International Journal of Biological Macromolecules. December 2018;
Yao L, Chen S, Li W. Fatostatin inhibits the development of endometrial carcinoma in endometrial carcinoma cells and a xenograft model by targeting lipid metabolism[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2020: 108327.

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