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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC5650-50T/48S
更新時間：2024-04-23
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1295
010-50973130
產品分類
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尿蛋白含量檢測試劑盒說明書（麗春紅比色法）
可見分光光度法
貨號：BC565
規(guī)格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 液體1 mL×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑一工作液：臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一：蒸餾水=0.25mL：2.25mL（2.5mL，1T）的比例配制試劑一工作液；
2、 標準品：5mg/mL BSA標準液。臨用前取80μL 5mg/mL BSA標準液，加入920μL蒸餾水，配制成0.4 mg/mL BSA標準液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
產品說明：
尿液中蛋白含量增加，表明腎臟系統(tǒng)的重吸收作用減弱，通常可作為腎臟疾病臨床診斷的輔助依據(jù)。
在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅染料，離心得到的蛋白質-染料復合物可溶解于堿性溶液，檢測其在560nm處的吸光值可計算得到樣本蛋白含量。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、離心機、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、5mL EP管、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理
1. 尿液等液體樣本：直接測定。若有渾濁請離心后取上清置于冰上待測。
二、測定步驟
1．可見分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長至560nm，蒸餾水調零。
2．操作表：
充分混勻，3500rpm常溫離心10min，棄全部上清，留全部沉淀。 | |||
試劑二 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
震蕩充分溶解沉淀，于560nm處測定各管吸光值，分別記為A測定、A標準和A空白，計算ΔA測定=A測定-A空白，ΔA標準=A標準-A空白。空白管和標準管只需測1-2次。 | |||
三、尿蛋白含量計算
尿蛋白含量（mg/mL）= ΔA測定×（C標÷ΔA標準）×V樣÷V樣= 0.4×ΔA測定÷ΔA標準
C標：標準管濃度，0.4mg/mL；V樣：加入樣本體積，1mL。
注意事項：
1、 實驗過程中離心步驟結束后，上清液需要全部除去，同時不可損失沉淀，否則會影響比色結果。
2、 如果?A測定小于0.004或測定管吸光值接近空白管，可以增加樣本量后再進行測定；如果?A測定大于0.3，建議將樣本用蒸餾水適當稀釋后再進行測定。注意同步修改計算公式。
參考文獻：
[1] Michael A Pesce, Carl S Strande. A new micromethod for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine[J]. Clinical Biochemistry, 1973, 19(11): 1265-1267.
[2] Jean Dube, Joel Girouard, Pierre Leclerc. et al. Problems with the estimation of urine protein by automated assays[J]. Clinical Biochemistry, 2005, 38(5): 479-485.
[3] Pan Ya. An analysis about the quantitative measurement of urinary protein[J]. China Health Standard Management, 2014, 5(18): 125-126.
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