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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法土壤系列BC3105-100T/48S土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒

土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Soil Nitrate Reductase(S-NR)Activity Assay Kit
別名
土壤硝酸還原酶試劑盒 S-NR Kit 土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒 土壤硝酸還原酶(S-NR)測試盒
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Read

產(chǎn)品型號:BC3105-100T/48S

更新時間:2024-04-11

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1758

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹


土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC3105
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體25 mL×1瓶-20℃保存
試劑二液體5 mL×1瓶-20℃保存
試劑三液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四液體5 mL×1瓶-20℃保存
試劑五液體10 mL×1瓶2-8℃保存
試劑六液體10 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支-20℃保存



注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、30-50目篩、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
二、測定步驟

  1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至520nm,分光光度計蒸餾水調(diào)零。

  2. NaNO2標(biāo)準(zhǔn)液的配制:用蒸餾水將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋1、0.8、0.6、0.40.2μmol/mL。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表:

序號稀釋前濃度(µmol/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(µmol/mL)
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2

備注:實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需50µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

  1. 樣本測定:

試劑名稱1.5mLEP管
測定管對照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
風(fēng)干土樣(g)0.050.05

NaNO2標(biāo)準(zhǔn)液(μL

50
蒸餾水(μL5050
50
試劑一(μL180180180180
試劑二(μL18
1818
混勻后,于37水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱反應(yīng)24h
試劑三(μL25252525
試劑二(μL
18

立刻混勻, 8000rpm室溫離心5min
上清液(μL80808080
試劑四(μL20202020
混勻后,于37水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱保溫20min
試劑五(μL50505050
試劑六(μL50505050

混勻,顯色20min后,取200μL至微量玻璃比色皿/96孔板,520nm下讀取各管吸光值,分別記為A測定、A對照、A標(biāo)準(zhǔn)、A空白。計算ΔA測定=A測定- A對照,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。每個測定管需設(shè)一個對照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需檢測1-2次。
三、S-NR活性計算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:
以1、0.80.6、0.40.2μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液為橫坐標(biāo)(x軸),ΔA標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)(y軸)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性回歸方程y=kx+b,將ΔA測定代入方程得到xμmol/mL)。
2、S-NR活性計算:

單位的定義:每g土樣每天中產(chǎn)生1μmol NO2ˉ的量為一個S-NR活力單位。
S-NR(U/g 質(zhì)量)=x×V標(biāo)準(zhǔn)÷W÷T=0.05x÷W
V標(biāo)準(zhǔn):反應(yīng)體系中加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積,0.05mL;W:風(fēng)干土樣,g;T:反應(yīng)時間,1d。
注意事項:

  1. 試劑一、試劑二和試劑四在冰上放置,用不完的試劑-20℃分裝保存,避免反復(fù)凍融。

  2. ΔA測定過小(小于0.01),可延長反應(yīng)時間(37℃水浴時間)。

  3. 當(dāng)ΔA大于1時,可以將上清液用蒸餾水稀釋后,再進行測定,計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC2990/BC2995  土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)活性檢測試劑盒
BC0040/BC0045  土壤硝態(tài)氮含量檢測試劑盒
BC1510/BC1515  土壤硝態(tài)氮含量檢測試劑盒


土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒































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