儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
半*氨酸（Cys）含量測(cè)試盒氨基酸代謝
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Cysteine(Cys) Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào)：BC0180-50T/48S

更新時(shí)間：2024-04-24

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：2160

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

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產(chǎn)品介紹

半*氨酸（Cys）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 詳見(jiàn)附件
可見(jiàn)分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC0180
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體25 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體45 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：用前一天，向試劑二中加5 mL蒸餾水充分溶解，再加磷酸1.25 mL，混勻后蓋緊（防止水分散失）沸水浴2h；冷卻后加20 mL蒸餾水，4℃可保存2周。（一瓶即可做50T，為延長(zhǎng)試劑盒使用時(shí)間，故多給一瓶）
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg半*氨酸。將標(biāo)準(zhǔn)品加入4.13mL蒸餾水得到20μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。4℃可以保存4周。

產(chǎn)品說(shuō)明：
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸：甲*氨酸、*氨酸和半*氨酸（Cys）。其中，Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸，從甲*氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，并且可與*氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成，經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分，還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外，Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面，在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性，并且補(bǔ)充巰基，以維持皮膚的正常代謝，調(diào)節(jié)表皮最下層的色素細(xì)胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過(guò)敏性皮膚等作用。
Cys還原磷鎢酸生成鎢藍(lán)，在600nm處有吸收峰；通過(guò)測(cè)定600nm吸光度，計(jì)算Cys含量。
技術(shù)指標(biāo)：
檢出限：0.0053 μmol/mL
線性范圍：0.03125-3 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、磷酸和蒸餾水。

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

液體樣本中半*氨酸提取：

取0.2mL液體樣本，加提取液0.3mL，充分混勻，11000rpm 4℃離心10min，取上清液待測(cè)。

組織中半*氨酸提?。?/span>

稱取約0.2g組織，加入0.5mL提取液，冰上充分研磨，11000rpm 4℃離心10min，取上清液待測(cè)。
二、測(cè)定步驟

分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到600nm，蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)液的配制：用蒸餾水將20μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625 μmol/mL濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
按下表加入各試劑

試劑名稱（μL）	測(cè)定管	標(biāo)準(zhǔn)管	空白管
樣本	200	-	-
標(biāo)準(zhǔn)品	-	200	-
蒸餾水	-	-	200
試劑一	500	500	500
試劑二	300	300	300

混勻后室溫靜置15min，于600nm處測(cè)定吸光值。
三、半*氨酸含量計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸，以?A（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）為y軸做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到方程y=kx+b。將（A測(cè)定管-A空白管）帶入方程求x值。

半*氨酸含量計(jì)算：

（1）按液體樣本的體積計(jì)算
半*氨酸含量（μmol/mL）=x×V樣總÷V=2.5x
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
半*氨酸含量（μmol/g 質(zhì)量）=x×V樣總÷W=0.5x÷W
V：液體樣本體積，0.2mL；V樣總：提取體系體積，0.5mL；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項(xiàng)：
如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

Huang Q, Wang M, Xia Z. The SULTR gene family in maize (Zea mays L.): gene cloning and expression analyses under sulfate starvation and abiotic stress[J]. Journal of plant physiology, 2018, 220: 24-33.
Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,et al. Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd²⁺ uptake and translocation in foxtail millet seedlings. Ecotoxicology and Environmental Safety. August 2018;(IF4.527)

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半*氨酸（Cys）含量測(cè)試盒氨基酸代謝 半*氨酸（Cys）含量測(cè)試盒氨基酸代謝

上一個(gè)：M 8360-100麥芽浸膏