產(chǎn)品型號:BC2525-100T/96S
更新時間:2024-04-11
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪 問 量 :711
010-50973130
產(chǎn)品分類
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微量法
貨號:BC2525
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑10 mg×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前將標(biāo)準(zhǔn)品用1mL蒸餾水溶解,配制成濃度為10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液待用,2-8℃可保存2周。
產(chǎn)品說明:
山*醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是糖運輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測山*醇含量變化。
山*醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡(luò)合物,在655nm波長有特征吸收峰。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.0583 mg/mL
線性范圍:0.125-4 mg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
稱取約0.1g樣本,加入1mL蒸餾水研磨成勻漿,置沸水浴中煮沸10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫后,8000g,常溫離心10min,取上清液待測。
二、測定步驟
分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至655nm,分光光度計用蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:臨用前將10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至4、2、1、0.5、0.25、0.125、0(空白管)mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。
標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表。
| 序號 | 稀釋前濃度(mg/mL) | 標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL) | 蒸餾水體積(µL) | 稀釋后濃度(mg/mL) |
| 1 | 10 | 400 | 600 | 4 |
| 2 | 4 | 500 | 500 | 2 |
| 3 | 2 | 500 | 500 | 1 |
| 4 | 1 | 500 | 500 | 0.5 |
| 5 | 0.5 | 500 | 500 | 0.25 |
| 6 | 0.25 | 500 | 500 | 0.125 |
| 7 | 0 | 0 | 500 | 0(空白管) |
備注:實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需230µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
樣本測定(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):
| 試劑(μL) | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
| 試劑一 | 35 | 35 |
| 試劑二 | 35 | 35 |
| 樣本 | - | 230 |
| 標(biāo)準(zhǔn)液 | 230 | - |
| 渦旋混勻,室溫靜置15min,8000g,常溫離心10min,取200μL上清液至微量玻璃比色皿或96孔板中,測655nm下吸光值A,分別記為A標(biāo)準(zhǔn)、A測定、A空白。ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測1-2次。 | ||
注意事項:
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
參考文獻:
Salvucci M E, Stecher D S, Henneberry T J. Heat shock proteins in whiteflies, an insect that accumulates sorbitol in response to heat stress[J]. Journal of Thermal Biology, 2000, 25(5): 363-371.
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