葡萄糖含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2505
規(guī)格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：2μmol/mL葡萄糖溶液；

2. 混合試劑的配制：使用前將試劑二和試劑三1：1等體積混合，用多少配多少。

產品說明：
葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物，而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生葡萄糖。就哺乳動物而言，葡萄糖不僅是大腦神經系統(tǒng)、肌肉、脂肪組織等的能源，而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。
葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并產生過氧化氫；過氧化物酶（Peroxidase，POD）催化過氧化氫氧化4-氨基安比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在505 nm 有特征吸收峰。
技術指標：
低檢出限：0.02 μmol/mL
線性范圍：0.03-5 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機、超聲破碎儀、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
若（A測定-A空白）小于0.005，建議加大提取樣本質量（或細胞數(shù)量）或者樣本上清液的加入量；（A測定-A空白）大于1.2，將上清液用蒸餾水稀釋即可。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
實驗實例：

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2. 取0.1g小鼠肝臟加入1mL蒸餾水進行前處理步驟，離心取上清后按測定步驟測定，用96孔板測得吸光值ΔA測定=A測定-A空白=0.856-0.051=0.805，ΔA標準=A標準-A空白=0.724-0.051=0.673。按樣本質量計算葡萄糖含量（μmol/g 質量）= 2×ΔA測定÷ΔA標準÷W=2×0.805÷0.673÷0.1= 23.923 μmol/g 質量

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2. 取0.1g綠蘿葉片加入1mL蒸餾水進行前處理步驟，離心取上清后按測定步驟測定，用96孔板測得吸光值ΔA測定=A測定-A空白=0.318-0.051=0.267，ΔA標準=A標準-A空白=0.724-0.051=0.673。按樣本質量計算葡萄糖含量（μmol/g 質量）= 2×ΔA測定÷ΔA標準÷W=2×0.267÷0.673÷0.1=7.935 μmol/g 質量

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2. 取5百萬Jurkat細胞樣本加入1mL蒸餾水進行前處理步驟，離心取上清后按測定步驟測定，用96孔板測得吸光值ΔA測定=A測定-A空白=0.057-0.051=0.007，ΔA標準=A標準-A空白=0.724-0.051=0.673。按細胞數(shù)量計算葡萄糖含量（μmol/10⁶ cell)  =0.4×ΔA測定÷ΔA標準=0.4×0.007÷0.673=4.16×10^-3 μmol/10⁶ cell

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相關發(fā)表文獻：
[1] Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion. Cell Death and Disease. March 2019; (IF5.959)
[2] Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019; 153:152-160. (IF2.87)
參考文獻：
[1] Basagni U, Bonicolini F. Ready to use liquid reagent for determining the glucose content in blood: U.S. Patent 5,077,199[P]. 1991-12-31.
[2] Kabasakalian P, Kalliney S, Westcott A. Enzymatic blood glucose determination by colorimetry of N, N-diethylaniline-4-aminoantipyrine[J]. Clinical chemistry, 1974, 20(5): 606-607.
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