原果膠含量檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
貨號(hào)：BC3685
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液一：80%乙醇，自備。即將80 mL無水乙醇和20 mL蒸餾水混合。

2. 試劑一：濃硫酸30 mL，自備。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg半乳糖醛酸，臨用前加入0.943 mL提取液三，配成50μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：
果膠是植物細(xì)胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠，不溶性果膠為原果膠。原果膠是不溶于水的物質(zhì)，但可在酸、堿、鹽等化學(xué)試劑及酶的作用下，加水分解轉(zhuǎn)變成水溶性果膠，在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領(lǐng)域具有較廣泛的應(yīng)用。
原果膠在堿性條件下水解為可溶性果膠，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為半乳糖醛酸，產(chǎn)物在強(qiáng)酸中與咔 唑縮合生成紫紅色化合物，在530nm處有特征吸收峰。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、丙 酮、濃硫酸、無水乙醇和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g木槿加入1mL 提取液一，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙 酮交替各洗2遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細(xì)胞壁，加入1mL提取液二浸泡15小時(shí)，4000g 25℃離心10min，棄上清，加入1mL提取液三，充分勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液之后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定= A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.21-0.12=0.09，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.4121x-0.0183計(jì)算X=0.2628μmol/mL，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：原果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)=x÷W=2.628 μmol/g 質(zhì)量。

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