木質(zhì)素過氧化物酶活性檢測試劑盒其他系列

產(chǎn)品簡介：

木質(zhì)素過氧化物酶活性檢測試劑盒其他系列
儲存條件
2-8℃
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Lignin peroxidase (Lip) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC1610-50T/48S

更新時間：2025-08-26

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1914

服務熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

產(chǎn)品介紹

木質(zhì)素過氧化物酶（Lip）活性檢測試劑盒說明書

紫外分光光度法

注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。

貨號：BC1610

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體85mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體11mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體6mL×1瓶	2-8℃保存

產(chǎn)品說明：

木質(zhì)素過氧化物酶（EC1.11.1.14）（Lip）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，是木質(zhì)素的生物降解過程中的主要木質(zhì)素降解酶類。Lip在飼料資源開發(fā)以及廢水、廢物處理領域有著廣闊的應用前景。藜蘆醇可以被Lip催化發(fā)生氧化反應，其產(chǎn)物藜蘆醛在310nm處有最大吸收峰，以藜蘆醇為反應底物，通過測定310nm處藜蘆醛的吸光值，可以判定Lip的酶活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、超聲波細胞破碎儀、研缽/勻漿器、1mL石英比色皿、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

1、組織：按照樣本質(zhì)量（g）：試劑一體積（mL）為1:5~10 的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿；10000g 4℃離心10min，取上清置冰上待測。

2、細菌或細胞樣本：收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（10⁴個）：試劑一體積（mL）為 500~1000:1 的比例（建議500萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一）加入試劑一，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率300W，超聲 3s，間隔 7s，總時間3min），10000g 4℃離心10min，取上清置冰上待測。

3、培養(yǎng)液或其他液體：直接檢測。若溶液渾濁則離心后取上清進行測定。

二、測定步驟

1、可見分光光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至310nm，蒸餾水調(diào)零。

2、測定前根據(jù)實驗用量取出部分試劑一、試劑二、試劑三置于37℃預熱10min以上。若一次性測定樣本過多，可根據(jù)使用量將試劑一、二、三按6:2:1比例配成工作液后進行預熱，測定時按照100μL樣本+900μL工作液加入1mL石英比色皿進行測定。

3、加樣表（在 1mL石英比色皿中依次加入下列試劑)：

試劑名稱（μL）	測定管
試劑一（μL）	600
試劑二（μL）	200
樣本（μL）	100
試劑三（μL）	100

將上述試劑分別加入1mL石英比色皿后迅速吹打混勻，從加完最后一個試劑開始計時，記錄第15s的吸光值A1，將混合液置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)5min，取出測定5min15s時的吸光值A2，計算ΔA=A2-A1，注意保證測定時間的準確性。

三、Lip活力的計算

1.按樣本蛋白質(zhì)濃度計算

酶活定義：37℃，pH4.5條件下，每mg組織蛋白每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活單位。

Lip活性（U/mg prot）= ΔA×V反總÷(?×d)×10⁹÷(V樣×Cpr)÷T=215.05×ΔA÷Cpr

2.按樣本質(zhì)量計算

酶活定義：37℃，pH4.5條件下，每g組織每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活單位。

Lip活性（U/g 質(zhì)量）= ΔA×V反總÷(?×d)×10⁹÷(V樣÷V樣總×W)÷T=215.05×ΔA÷W

3.按細菌/細胞數(shù)量計算

酶活定義：37℃，pH4.5條件下，每10⁴細菌/細胞每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活單位。

Lip活性（U/10⁴ cell）= ΔA×V反總÷(?×d)×10⁹÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)÷T=215.05×ΔA÷細胞數(shù)量

4、按照樣本體積計算

酶活定義：37℃，pH4.5條件下，每mL血清或液體樣本每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需酶量為一個酶活單位。

Lip活性（U/mL）=ΔA×V反總÷(?×d)×10⁹÷V樣÷T=215.05×ΔA

ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d:比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，0.001L；V樣：加入樣本體積，0.1mL，V樣總：提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，5 min；10⁹：單位換算系數(shù)，1mol=10⁹nmol。

實驗實例：

取0.09g杏鮑菇加入1mL試劑一進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清置冰上，之后按照測定步驟操作，測得計算A1=0.228，A2=0.55，ΔA=A2-A1=0.322，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

Lip活性（U/g 質(zhì)量）=ΔA×V反總÷(?×d)×10⁹÷V樣÷T=672.95U/g 質(zhì)量。

參考文獻：

[1] Konadu K T, Harrison S, Osseo-Asare K. et al. Transformation of the carbonaceous matter in double refractory gold ore by crude lignin peroxidase released from the white-rot fungus[J]. International Biodeterioration & Biodegradation, 2019, 143(1996):104735.

[2] Ahmed A A Q, Mckay T J M. Potential of Bacillus sp. LG7 as a Promising Source of Ligninolytic Enzymes for Industrial and Biotechnological Applications[J]. Proceedings of the National Academy of ences India, 2017.

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