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基因組提取試劑盒 質粒提取試劑盒
產品簡介:

基因組提取試劑盒 質粒提取試劑盒
貨號:D6942
規(guī)格:100T
質粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中。質粒主要存在于細菌、放線菌和真菌細胞中,它具有自主復制和轉錄能力,能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達所攜帶的遺傳信息。

產品型號:D6942

更新時間:2025-08-22

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基因組提取試劑盒 質粒提取試劑盒
貨號:D6942
規(guī)格:100T


產品說明:
    質粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中。質粒主要存在于細菌、放線菌和真菌細胞中,它具有自主復制和轉錄能力,能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達所攜帶的遺傳信息。


質粒提取原理及流程:
    較常用的質粒DNA提取方法有3種:堿裂解法、煮沸法和去污劑(如Triton和SDS)裂解法。前兩種方法比較劇烈,適用于較小的質粒(<15kb)。去污劑裂解法則比較溫和,一般用于分離大質粒(>15kb)。堿裂解法是一種應用為廣泛的制備質粒DNA的方法,其原理為:染色體DNA比質粒DNA分子大得多,且染色體DNA為線狀分子,而質粒DNA為共價閉合環(huán)狀分子;當用堿處理DNA溶液時,線狀染色體DNA容易發(fā)生變性,共價閉環(huán)的質粒DNA在回到中性即恢復其天然構象;變性染色體DNA片段與變性蛋白質和細胞碎片結合形成沉淀,而復性的超螺旋質粒DNA分子則以溶解狀態(tài)存在液相中,離心去除沉淀后,就可從上清中回收質粒DNA。目前,市面上質粒提取試劑盒大多數(shù)都是采取上述的堿裂解方法,不同之處在于純化方式。目前比較常用的純化系統(tǒng)是硅基質吸附材料,其原理為在高鹽環(huán)境下質粒DNA能夠結合到硅基質上,然后用低鹽緩沖液或水將質粒DNA從硅基質上洗脫下來。得到的質粒可以用于酶切、PCR、測序、細菌轉化、轉染等分子生物學實驗。


質粒鑒定與評價:
瓊脂糖電泳檢測
    堿裂解法提取的質粒經瓊脂糖電泳進行鑒定時,理想狀況是只出現(xiàn)超螺旋—條帶,但在質粒提取過程中,由于機械力、酸堿度、試劑等原因,使質粒DNA鏈發(fā)生斷裂,可能出現(xiàn)兩條帶或者出現(xiàn)三條帶,這三條帶電泳遷移率從快到慢,分別是超螺旋、開環(huán)和復制中間體(即沒有復制*的兩個質粒粘連在—起)。如果加溶液Ⅱ后過度振蕩,會在遠離這三條帶的位置出現(xiàn)條帶,這條帶泳動得較慢,是大腸桿菌基因組DNA的片斷。非常偶然的是,有時候提取的質粒會出現(xiàn)4個以上的條帶,這是由于特殊的DNA序列導致了不同程度的超螺旋(超螺旋的圈數(shù)不同)所致。但是,只要質粒經單酶切鑒定后,只有單一條帶,就證明沒有基因組的污染。酶切檢測質粒提取后,為了進—步鑒定質粒的正確與否,就要進行酶切鑒定,通過與Marker對比,確定質粒的分子量大小。用紫外線分光光度計檢測濃度測定標準為:OD 260 值為1相當于大約50ug/ml雙鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值1.7-1.9之間說明所得DNA純度較好。OD 260 /OD 280 比值若低于1.7說明可能有蛋白污染。OD 260 /OD 280 比值若高于2.0則說明DNA有可能已降解。如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子濃度會影響光吸收值,但并不表示純度低。

 

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3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
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運輸說明:

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2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
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