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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒

細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒

更新時間:2019-07-30點擊次數(shù):1891

Hoechst 33342/PI雙染試劑盒

品牌:Solarbio | 貨號:CA1120

 

英文名稱

Hoechst 33342/PI Double Stain Kit

儲存條件

4℃,有效期6個月;-20℃,有效期1年

單位

 

產(chǎn)品說明:

 

Solarbio生產(chǎn)的細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細胞凋亡與細胞壞死檢測方法。    本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)雙染的方法。細胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮。Hoechst33342可以穿透細胞膜,染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜,對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于壞死細胞,其細胞膜的完整性喪失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后,使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時,正常細胞為弱紅色熒光+弱藍色熒光,凋亡細胞為弱紅色熒光+強藍色熒光,壞死細胞為強紅色熒光+強藍色熒光。參考下圖,左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細胞,右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細胞。

 

染色快速方便,兩種染料的染色僅需20-30分鐘,一步染色即可完成。    使用方便,使用流式細胞儀檢測時,無需稀釋等配制過程,也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。    本試劑盒足夠檢測100個樣品,每個樣品的細胞數(shù)量可以為1×105-1×106。

 

產(chǎn)品內(nèi)容:

 

                                        100T           500T

細胞染色緩沖液                100ml             500ml

Hoechst染色液                 0.5ml             2.5ml

PI染色液                           0.5ml              2.5ml

說明書                               1 份                1 份

 

使用說明:

 

1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管內(nèi),離心棄上清。細胞沉淀用0.8-1ml細胞染色緩沖液重懸。

2. 加入5微升Hoechst染色液。

3. 加入5微升PI染色液。

4. 混勻,冰浴或4℃孵育20-30分鐘。

5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測,檢測前離心沉淀細胞,用PBS洗滌一次,再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測,可以不收集細胞,直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次,再在熒光顯微鏡下觀察。

 

注意事項:

 

需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。 染色后宜盡快檢測。

Hoechst 33342對人體有害,碘化丙啶(PI)對人體有刺激性,請注意適當(dāng)防護。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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