2016-422
透析是一個簡單的擴散過程,溶質中小分子物質從高濃度溶液通過半透性膜擴散到低濃度溶液中,直滲透壓達到平衡。由于多孔膜的選擇性,使得溶質中小分子物質可以通過,而較大物質則被截留,從而分離出不同大小分子量的物質,依據分子量大小截留,可用于分離工藝,改變或控制透析的條件,可在多種透析應用中得到預期效果,通過截留分子量(MWCO)可使目標分子得到分離。所以透析袋分子量的選擇就決定了實驗的成敗。這篇文章就詳細介紹了如何選擇合適的透析袋。透析膜的材質透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的多的還...
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2016-421
姬姆薩染液又稱吉姆薩染色液,姬姆薩染原液,為天青色素、伊紅、次甲藍的混合物。常用作對血液涂抹標本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等標本進行染色的染色方法。姬姆薩染色液的配制方法很簡單,但是現(xiàn)在很多實驗室都開始買現(xiàn)成的姬姆薩染液,這樣節(jié)省了時間,染色液的價格也不貴。姬姆薩染液配制方法:甲液:取瑞氏染粉1克,姬姆薩染粉0.3g,置于干燥清潔研缽中,另備甲醇(不含水或丙酮)500ml分數次加少量甲醇研磨,分次收集于棕色玻璃瓶中,每天早晚各搖3分鐘,經1星期后即可使用。...
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2016-421
瑞氏-姬姆薩染色液是利用Romanowsky??Stain?技術原理改良而成的。主要應用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,著色清晰,色澤純正,但是對胞核著色偏深,核結構顯示較差。瑞氏-姬姆薩染色液原理瑞氏-姬姆薩染色液主要應用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowsky??Stain?技術原理改良而成的。細胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內部的一種過程,此過程既有物理吸附作用,又有化學親和作用。各種細胞及細胞的各種成分...
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2016-421
嘌呤霉素(puromycin;PM)是一種蛋白質合成抑制劑,它具有與tRNA分子末端類似的結構,能夠同氨基酸結合,代替氨?;膖RNA同核糖體的A位點結合,并摻入到生長的肽鏈中。用嘌呤霉素篩選細胞方法如下:嘌呤霉素篩選細胞轉染(24孔板進行)或電轉后培養(yǎng)24小時,按10%密度傳代(傳36mm平皿),繼續(xù)培養(yǎng)24小時,待細胞密度增20%-25%回合時;去掉培養(yǎng)液,PBS洗一次,加入按照佳嘌呤霉素篩選細胞的濃度(殺傷曲線試驗確定)配制好的嘌呤霉素篩選細胞培養(yǎng)基2-3ml。根據培養(yǎng)...
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2016-421
嘌呤霉素(puromycin;PM)是一種抗生素,廣泛用作蛋白質合成的抑制劑。其結構與氨酰tRNA3′端上的AMP結構相似,肽酰轉移酶能促使氨基酸與嘌呤霉素結合形成肽酰嘌呤霉素,從核糖體上脫落,從而使蛋白質合成反應中斷。嘌呤霉素的作用如下:嘌呤霉素的作用:嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomycesalboniger)發(fā)酵代謝產生的一種氨基糖苷類抗生素,嘌呤霉素Puromycin通過抑制蛋白質合成而殺死革蘭氏陽性菌,各種動物和昆蟲細胞。嘌呤霉素Pur...
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2016-420
Bradford法測蛋白濃度是利用蛋白質-染料結合的原理,定量地測定微量蛋白質濃度的快速靈敏的方法。Bradford法測蛋白濃度原理考馬斯亮藍(CBB)測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種??捡R斯亮藍在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當它與蛋白質結合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質—色素結合物在595nm波長下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成正比,因此可用于蛋白質的定量測定。蛋白質與考馬斯亮藍結合在2min左右的時間內達到平衡,完成反應十分迅速;其結合物在室溫下1h內保持穩(wěn)定。該...
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2016-420
Bradford法又稱考馬斯亮藍法,是Bradford于1976年建立起來的一種蛋白質濃度的測定方法。bradford法定量蛋白質的原理是馬斯亮藍(CBB)測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;以下是bradford法定量蛋白質的原理及含量測定流程bradford法定量蛋白質的原理考馬斯亮藍(CBB)測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種??捡R斯亮藍在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當它與蛋白質結合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質—色素...
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2016-419
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。胎牛血清的主要作用1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂...
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