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IPTG配制的方法及使用說明

IPTG是一種作用*的誘導(dǎo)劑，不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應(yīng)用。IPTG溶液的配制很簡單：在8ml蒸餾水中溶解2gIPTG后，用蒸餾水定容10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。IPTG的使用方法：先把IPTG配制成24mg/ml（100mM）的水溶液，并進(jìn)行過濾除菌后保存。然后在100ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal（20?mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100μl的Amp（100mg/...

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結(jié)晶紫染液的配制方法

結(jié)晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一種組織或細(xì)胞染色時常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合，從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色。結(jié)晶紫染液的配制方法如下：結(jié)晶紫染液的配制結(jié)晶紫(crystalviolet)液：結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸銨水溶液80mL將兩液混勻置24h后過濾即成。結(jié)晶紫染液使用方法1.樣品處理a)對于石蠟切片：二甲苯中脫蠟5-10分鐘。換...

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結(jié)晶紫指示劑變色范圍是多少

結(jié)晶紫（又叫甲基紫，俗名紫藥水）pH0.5(綠)～2.0(藍(lán))。以冰醋酸作溶劑，用酸滴定液滴定堿時，常用的指示劑為結(jié)晶紫，還有α－萘酚苯甲醇（0.2％冰醋酸溶液，其堿式色為黃色，酸式色為綠色）和喹哪啶紅（0.1％甲醇液，其堿式色為紅色，酸式色為無色）結(jié)晶紫性狀:具有金屬光澤的暗綠色結(jié)晶形粉末。熔點為215℃（分解）。溶于水、乙醇和三氯甲烷,溶液呈紫色。不熔于，濃酸中呈黃色，當(dāng)pH值增大時其顏色變化是黃→綠→藍(lán)→紫.與Sn4＋、Tl3＋、Au3＋和Sb3＋的鹵絡(luò)陰離子及MoO、...

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常見的指示劑有哪些

不同的指示劑在不同的酸堿環(huán)境下呈現(xiàn)不同的顏色。指示劑的分類1、酸堿指示劑。指示溶液中H+濃度的變化，是一種有機(jī)弱酸或有機(jī)弱堿，其酸性和堿性具有不同的顏色。指示劑酸HIn在溶液中的離解常數(shù)Ka=[H+][In-]/[HIn]，即溶液的顏色決定于[In-]/[HIn]，而[In-]/[HIn]又決定于[H+]。以甲基橙（Ka=10-3.4）為例，溶液的pH4.4時，呈堿性，具黃色；而在pH3.1～4.4，則出現(xiàn)紅黃的混合色橙色，稱之為指示劑的變色范圍。不同的酸堿指示劑有不同的變色...

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總結(jié)實驗室常用染色液的制備方法

染色液是實驗室中常用的試劑之一，分為天然染液和人工染料，也分堿性染料和酸性染料，以下來詳細(xì)介紹一下實驗室常見染色液的配制。⒈碘-碘化鉀（I2-KI）溶液能將淀粉染成藍(lán)紫色，蛋白質(zhì)染成黃色，也是植物組織化學(xué)測定的重要試劑。配方：碘化鉀2g；蒸餾水300ml；碘1g先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中，待全溶解后再加碘，振蕩溶解后稀釋300mL，保存在棕色玻璃瓶內(nèi)。用時可將其稀釋2-10倍，這樣染色不致過深，效果更佳。⒉蘇丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪、揮發(fā)油、樹...

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熒光免疫染色和DAPI染色實驗步驟

免疫染色實驗方法和步驟免疫染色(immunolstaining)包括免疫熒光(immunolfluorescence)、免疫組化(immunolhistochemistry)、免疫細(xì)胞化學(xué)(immunolcytochemistry)等，可以參考如下步驟進(jìn)行操作。1.樣品準(zhǔn)備(Samplepreparation)對于貼壁細(xì)胞：可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培養(yǎng)細(xì)胞，然后到預(yù)定時間時進(jìn)行固定等后續(xù)操作。也可以用潔凈的蓋玻片，70%乙醇中浸泡后，用無菌的鑷子放置到6孔板...

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DAPI染DNA的原理及使用方法（包含DAPI配制）

DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式為C16H15N5·2C3H6O3，分子量457.48。DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料。它結(jié)合到雙鏈DNA小溝的AT堿基對處，一個DAPI分子可以占據(jù)三個堿基對的位置。結(jié)合到雙鏈DNA上DAPI分子的熒光強(qiáng)度提高大約20倍，常用與熒光顯微鏡觀測，根據(jù)熒光的強(qiáng)度可以確定DNA的量。另外，因為DAPI可以透過完整的細(xì)胞膜，它可...

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透析袋原理介紹及使用方法步驟

自1861年發(fā)明透析方法今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實驗室簡便常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)。下面分別介紹透析袋和透析膜使用方法和步驟透析袋使用前處理方法：1.把透析袋剪成適當(dāng)長度（10-20cm）的小段。2.在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和10mmol...

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