2017-228
免疫球蛋白指有抗體活性的動物蛋白,主要存在于血漿中,也見于其他液體、組織和一些分泌液中。免疫球蛋白因結(jié)構(gòu)不同可分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE5種,多數(shù)為丙種球蛋白。免疫球蛋白的分類:免疫球蛋白可分為五類,即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE),IgG,IgA和IgM還有亞類。IgG,IgD,IgE均為單體,分泌液中IgA(SIgA)是雙體,IgM是五聚體。免疫球蛋白IgG人體血清免疫...
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2017-228
DNAmarker一般指的是分子量標(biāo)記,在分子生物學(xué)試驗中指的是電泳中用來代表DNA長度的標(biāo)記,基因組學(xué)上是指個體特異性的遺傳標(biāo)記。那么DNAmarker在不同的領(lǐng)域具體有什么用途和意義呢?DNAmarker的用途:DNAMarker是分子量不同的DNA片段,主要用途就是DNA分子凝膠電泳時,加樣用做對比來檢測瓊脂糖凝膠是否有問題。通過其大小可以粗略估算樣品DNA分子量的大小。主要是要獲得病毒等大的基因組片段,然后用適當(dāng)?shù)拿盖?,切?以后,就能得到相應(yīng)的圖譜?,F(xiàn)在常用的DNA...
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2017-228
蛋白質(zhì)濃度測定是利用化學(xué)或物理方法測定蛋白質(zhì)濃度,一般蛋白濃度測定的方法有很多種,每種方法都有優(yōu)點和局限性,下面我們就具體看一下蛋白濃度測定的方法都有哪些。蛋白濃度測定的方法:1.紫外分光光度法紫外光譜吸收法測定蛋白質(zhì)含量是講蛋白質(zhì)溶液直接在紫外分光光度計中測定的方法,不需要任何試劑,操作簡單且易回收。蛋白質(zhì)溶液在280nm附近有強烈的吸收,這是由于蛋白質(zhì)中酪氨酸、色氨酸殘基而引起的,所以光密度受這兩種氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取過程中雜有的核酸對測定結(jié)果引起極大誤差,...
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2017-228
克拉霉素又名加紅霉素,是紅霉素的衍生物,在生化試劑實驗研究中,可用于分子生物學(xué)和組織培養(yǎng)。克拉霉素的用途:克拉霉素為生化試劑,在組織培養(yǎng)中起到防止微生物污染和抗性篩選的作用。另外再醫(yī)療中克拉霉素品屬14元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素??咕V與紅霉素、羅紅霉素等相同,但對革蘭陽性菌如鏈球菌屬、肺炎球菌、葡萄球菌的抗菌作用略優(yōu),且對誘導(dǎo)產(chǎn)生的紅霉素耐藥菌株亦具一定抗菌活性。克拉霉素及其在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物對流感桿菌的抗菌作用增強。該品對淋球菌、李斯忒菌、空腸彎曲菌也有一定作用,而對嗜肺軍團菌、...
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2017-27
膜再生液又稱為Western抗體洗脫液,常用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。適用于Western化學(xué)發(fā)光檢測后的蛋白膜的重復(fù)利用,尤其適用于PVDF膜,其次為硝酸纖維素膜。那么膜再生液的作用具體有哪些呢?膜再生液的作用:使用strippingbuffer可以去除一抗和二抗,然后可以重新利用膜。使用膜再生液可以對同一張膜進行多次WESTERNBLOT檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使...
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2017-27
膜再生液可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進行下一輪WesternBlot實驗。一般stripping的原理都是利用蛋白變性以及利用beta-mercaptoethanol打開-s-s-,使一抗二抗解聚變性而被洗去,但洗脫的強度是一個關(guān)鍵,小了抗體洗不干凈影響re-probe,大了又造成抗原的損失。膜再生液的配制:方法一:需要50℃溫?。㏒trippingBuffer:β-mercaptoethanol342μl;20%SDS5ml;1MT...
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2017-24
2017-23
甘氨酸同Tris(三羥甲基氨基甲烷)一起組成電泳緩沖液中的緩沖對,可以穩(wěn)定電泳過程中的PH值。在SDS-PAGE不連續(xù)電泳中,制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統(tǒng),濃縮膠是pH6.7,分離膠pH8.9;而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮膠中,其pH環(huán)境呈弱酸性,因此甘氨酸解離很少,其在電場的作用下,泳動效率低;而CL離子卻很高,兩者之間形成導(dǎo)電性較低的區(qū)帶,蛋白分子就介于二者之間泳動。由于導(dǎo)電性與電場強度成反比,這一區(qū)帶便形成了較高的電壓梯度,壓著蛋白質(zhì)...
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