2019-92
提取DNA的方法總結(jié)與比較DNA提取是一項(xiàng)經(jīng)常要做的實(shí)驗(yàn),下面我們就總結(jié)了四種dna提取方法并做詳細(xì)說(shuō)明和比較。一.濃鹽法提取DNA:A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的三氯甲烷一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時(shí)蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及三氯甲烷相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來(lái).B.也可用0.15MNaCL液反復(fù)洗滌細(xì)胞破碎液除去RNP,再以1...
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2019-830
幾種核酸染料的比較1、EB(溴化乙錠)溴化乙錠是一種高度靈敏的嵌入性熒光染色劑,為強(qiáng)致癌誘變劑,但價(jià)格便宜。它與DNA的結(jié)合幾乎沒(méi)有堿基序列特異性。在高離子強(qiáng)度的飽和溶液中,大約每2.5個(gè)堿基插入一個(gè)溴化乙錠分子。EB的這種特性使其成為一種核酸染料,常用于瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色。溴化乙錠在紫外區(qū)302nm和366nm處有吸收峰,在紫外光的照射下,溴化乙錠可被激發(fā)出橙紅色的熒光(590nm)。結(jié)合有DNA的溴化乙錠復(fù)合物的熒光強(qiáng)度要比沒(méi)有結(jié)合DNA的染料高出20-30倍,因...
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2019-829
一、單細(xì)胞核提取的方法1.Ficoll分層液法Ficoll分層液法是一種單次密度梯度離心分離法.聚蔗糖-泛影葡胺是一種較理想的細(xì)胞分層液,其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物稱聚蔗糖(商品名為Ficoll),分子量為40kD,具有高密度、低滲透壓、無(wú)毒性的特點(diǎn).高濃度的Ficoll溶液粘性高,易使細(xì)胞聚集,故通常使用60g/L的低濃度溶液,密度為1.020,添加比重為1.200的泛影葡胺(urografin)以增加密度.國(guó)外常用商品Isopaque或Hypaque,故又稱Fico...
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2019-828
細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程,而是主動(dòng)過(guò)程,它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用;它并不是病理?xiàng)l件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過(guò)程。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),就像樹(shù)葉或花的自然凋落一樣,對(duì)于這種生物學(xué)觀察,借臘“Apoptosis”來(lái)表示,意思是像樹(shù)葉或花的自然凋落,可譯為細(xì)胞凋亡。其實(shí)從嚴(yán)格的詞學(xué)意義上來(lái)說(shuō),細(xì)胞程序性死亡與細(xì)胞凋亡是有很大區(qū)別的。細(xì)胞...
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2019-827
DH5α感受態(tài)細(xì)胞品牌:Solarbio|貨號(hào):C1100本公司生產(chǎn)的DH5α感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝制備得到,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,-70℃保存3-5個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變?;蛐?supE44△lacU169(φ80lacZ△M15)hsdR17recA1endA1gyrA96thi-1relA1特點(diǎn):一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株。其φ80lacZ△M15基因的產(chǎn)物可與pUC...
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2019-822
全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))品牌:Solarbio|貨號(hào):BC3710儲(chǔ)存條件-20℃,避光,有效期少1年單位盒全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。產(chǎn)品組成:操作方法:1、組織總蛋白的提取在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置...
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2019-821
植物蛋白提取試劑盒品牌:Solarbio|貨號(hào):BC3720別名植物蛋白抽提試劑盒英文名稱PlantProteinExtractionKit儲(chǔ)存條件-20℃,避光,有效期少1年單位盒植物蛋白提取試劑盒用于植物組織中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑,作用溫和,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶的研究。本品僅用于科研。產(chǎn)品組成:產(chǎn)品說(shuō)明:本試劑盒用于植物組織中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑,作...
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2019-820
Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒(1000T)品牌:Solarbio|貨號(hào):PC0030英文名稱LowryProteinAssayKit儲(chǔ)存條件BSA附件-20℃,其它試劑RT,有效期1年單位盒保存:BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存有效期少3個(gè)月,-20℃保存有效期少一年,其他試劑室溫保存有效期少一年。試劑開(kāi)封使用后請(qǐng)及時(shí)密閉保存,F(xiàn)olin酚乙試劑顏色變成深綠色即失效。產(chǎn)品組成:產(chǎn)品說(shuō)明:Folin-酚試劑法包括兩步反應(yīng):步是在堿性條件下,蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物;第二步是...
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