2012-1129
測(cè)試劑盒檢測(cè)原理ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相...
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2012-1129
膠回收試劑盒操作步驟(omega)1.配制瓊脂糖EB凝膠,電泳以分離DNA片段。任何類型或等級(jí)的瓊脂糖都可以使用。我們強(qiáng)烈的推薦使用新鮮的TAE/TBE電泳緩沖液。不要重復(fù)使用電泳緩沖液,舊的電泳緩沖液PH會(huì)增加而降低DNA的回收產(chǎn)量;2.電泳足夠時(shí)間后,在紫外燈下小心地把所需的DNA的片段切下來。并盡量去除多余的凝膠。注意:DNA在紫外燈下的曝光的時(shí)間不要超過30秒,同時(shí)在紫外燈下操作的時(shí)候一定要戴保護(hù)眼鏡。3.稱取空離心管的重量,切下帶目的片段的凝膠裝在1.5ml離心管中...
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2012-1127
細(xì)胞培養(yǎng)的消毒方法:消毒方法分為三類:物理滅菌法(紫外線、濕熱、干烤、過濾等),化學(xué)滅菌法(各種化學(xué)消毒劑)和抗生素。(1)紫外線消毒:用于空氣,操作臺(tái)表面和不能使用其它法進(jìn)行消毒和培養(yǎng)器皿。紫外線直接照射方便、效果好,經(jīng)一定的時(shí)間照射后,可以消滅空氣中大部分細(xì)菌,培養(yǎng)室紫外線燈應(yīng)距地面不超過2.5米,且消毒進(jìn)物品不宜相互遮檔,照射不到的地方起不到消毒作用。紫外線可產(chǎn)生臭氧,污染空氣,試劑及培養(yǎng)液都有不良影響,對(duì)人皮膚也有傷害,不宜近照射。(2)溫?zé)嵯荆杭锤邏赫魵庀荆且?..
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2012-1121
尿同型胱氨酸實(shí)驗(yàn)室檢查①尿同型胱氨酸測(cè)定:可用篩查法,即硝普鈉試驗(yàn),1ml尿液中加入5%氰化鎂水溶液,放置5分鐘,加入5%硝普鈉水溶液一滴,出現(xiàn)紅色或紫紅色為陽(yáng)性,表示尿中含硫氨基酸過量。②確診:應(yīng)進(jìn)行血液氨基酸分析分析,本病血中同型胱氨酸、半胱氨酸含量增高,蛋氨酸水平則根據(jù)生化缺陷類型二變化。③明確分型:可以通過測(cè)定肝活檢標(biāo)本或培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞酶活性來進(jìn)行,也可用此法檢出雜合子。④產(chǎn)前診斷:可測(cè)羊水或絨毛膜細(xì)胞的酶活性。
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2012-1120
原裝ELISA試劑盒選擇◎應(yīng)盡量選擇正規(guī)廠家,產(chǎn)品經(jīng)相應(yīng)政府部門審核認(rèn)可,試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)?!蜢`敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽(yáng)性檢出的能力?!蛱禺愋裕撼S媒徊娣磻?yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測(cè)定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽(yáng)性,所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)?!蚓芏龋篍LISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍?!?..
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2012-1119
ELISA的操作要點(diǎn):的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。一、標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他...
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2012-1116
HSV單克隆抗體的檢測(cè)方法包括:傳統(tǒng)培養(yǎng)法:“金標(biāo)準(zhǔn)”,時(shí)間長(zhǎng),標(biāo)準(zhǔn)方法需2~14天,改良法也需要16-48小時(shí),實(shí)驗(yàn)室條件要求較高。分子生物學(xué)檢測(cè):包括核酸雜交技術(shù)和PCR。更敏感,并可同時(shí)對(duì)HSV進(jìn)行分型,但實(shí)驗(yàn)要求較高,有假陽(yáng)性問題。免疫學(xué)檢測(cè):以抗HSV單克隆抗體為基礎(chǔ),包括抗原檢測(cè)和血清學(xué)檢查,具體方法有免疫熒光試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)、ELISA等。由于抗體分子具有特異識(shí)別抗原的功能,抗體技術(shù)一直是生物技術(shù)的熱點(diǎn)領(lǐng)域。免疫學(xué)檢測(cè)的技術(shù)關(guān)鍵之一是制備特異性強(qiáng),親和力大,滴...
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2012-1113
黃曲霉毒素B1ELISA試劑盒樣本前處理步驟實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:配制60%甲醇水溶液(v/v,60:40)和20%甲醇水溶液(v/v,20:80)。注意:請(qǐng)配制上述溶液,以免影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性。1.脂肪含量低的固體樣品(如大米、玉米、小麥和飼料等)1、稱取5g粉碎樣品于100mL帶塞三角瓶?jī)?nèi),準(zhǔn)確加入25mL60%甲醇水溶液。2、將加入了甲醇水溶液的樣品放入振蕩器內(nèi)(或用手強(qiáng)力振蕩),充分振蕩3min后,用濾紙過濾,收集濾液。3、取濾液2mL,加入6mL20%甲醇水溶液,混勻,用what...
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